細(xì)胞培養(yǎng)室搬遷 無菌 + 細(xì)胞活性保障精簡(jiǎn)要點(diǎn)

核心：分階無菌管控、恒溫穩(wěn)運(yùn)、新室預(yù)標(biāo)、全程無暴露，全流程阻斷污染，減少細(xì)胞應(yīng)激損傷。

一、搬遷前：雙室籌備，細(xì)胞預(yù)處理

新室：完成潔凈 / 溫濕度 / 壓差調(diào)試并連續(xù)運(yùn)行 72h，臭氧 + 酒精消毒，空白培養(yǎng)基驗(yàn)證無菌；提前校準(zhǔn)培養(yǎng)箱、超凈臺(tái)等設(shè)備，接通無菌水 / CO?并調(diào)試。

舊室：細(xì)胞選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期處理，貼壁 / 懸浮細(xì)胞均制高濃度懸液，加凍存液梯度凍存（珍貴株留舊室液氮備份）；無菌耗材雙層密封、非無菌設(shè)備外表面消毒，液氮罐補(bǔ)滿液。

二、搬遷中：全程無菌轉(zhuǎn)運(yùn)，精準(zhǔn)控溫

細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)：凍存細(xì)胞用 - 80℃干冰 / 程控低溫箱，活細(xì)胞（僅短途）用 37℃恒溫箱，全程密封、防震蕩，不隨意開蓋；

設(shè)備 / 耗材：無菌與非無菌分開運(yùn)，所有物品進(jìn)新室前，在緩沖間做 75% 酒精表面消毒，拆外層包裝后移入；

人員動(dòng)線：專業(yè)人員穿無菌連體服，走舊室無菌口→專用通道→新室無菌口單向動(dòng)線，不交叉、不折返。

三、搬遷后：新室復(fù)校，無菌復(fù)蘇復(fù)培

設(shè)備歸位：外表面二次消毒，超凈臺(tái)紫外 + 送風(fēng)、培養(yǎng)箱校準(zhǔn) CO?/ 溫濕度后，均用空白培養(yǎng)基驗(yàn)證無菌；無菌耗材移入超凈臺(tái)，冷藏試劑立即歸位；

細(xì)胞復(fù)蘇：凍存管 37℃水浴 1-2min 快速融解，超凈臺(tái)內(nèi)稀釋 DMSO、離心重懸后接種，24h 觀察、48h 換液；活細(xì)胞立即入培養(yǎng)箱靜置 2-4h，換新鮮培養(yǎng)基復(fù)培；

環(huán)境監(jiān)控：連續(xù) 7 天監(jiān)測(cè)新室沉降菌 / 浮游菌，每日記錄設(shè)備參數(shù)，超凈臺(tái) / 培養(yǎng)箱定期無菌檢測(cè)。

四、核心防護(hù)細(xì)節(jié)

不同細(xì)胞株分開凍存、轉(zhuǎn)運(yùn)、復(fù)蘇，標(biāo)注清晰不混用，杜絕交叉污染；

細(xì)胞全程避溫度驟變，凍存≥-80℃、活細(xì)胞 37℃±1℃，復(fù)蘇融解必須快速；

所有操作均在超凈臺(tái)完成，耗材 / 培養(yǎng)基確保無菌，設(shè)備全程精準(zhǔn)標(biāo)定；

新室執(zhí)行嚴(yán)格無菌管理，非培養(yǎng)人員禁止入內(nèi)，定期臭氧消毒。

五、簡(jiǎn)易應(yīng)急

溫度異常：凍存細(xì)胞回升至 - 60℃以上就近入液氮，活細(xì)胞偏離溫度超 2h 立即換液加保護(hù)劑；

密封破損：重新消毒封裝，廢棄疑似污染耗材；

活性偏低：換新鮮培養(yǎng)基，適當(dāng)調(diào)整 CO?濃度，加生長(zhǎng)因子；

雜菌污染：立即隔離污染細(xì)胞，消毒相關(guān)設(shè)備，更換所有耗材 / 培養(yǎng)基。

廣州沃霖成立于2013年，19、23年被評(píng)為高xin技術(shù)企業(yè)，2023年榮獲“專精特新"企業(yè)的稱號(hào)，廣州沃霖是一家專注于潔凈車間、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)施工的工程建造企業(yè)，具建筑裝修工程專業(yè)承包二級(jí)，ISO三項(xiàng)認(rèn)證，4項(xiàng)發(fā)明zhuanli的施工企業(yè)。